宠物药敏检测方法的正确认识

选药盒的技术问题 1. 药敏检测方法的正确认识药敏检测是一种体外实验,代表细菌在体外的药敏敏感性。受到药物代谢、剂型、给药方式、个体差异等影响,体外药敏结果与体内药敏结果有一定差异。但由于在人和动物细菌感染

选药盒的技术问题

1. 药敏检测方法的正确认识

药敏检测是一种体外实验,代表细菌在体外的药敏敏感性。受到药物代谢、剂型、给药方式、个体差异等影响,体外药敏结果与体内药敏结果有一定差异。但由于在人和动物细菌感染的治疗中,无法通过体内实验检验药物的敏感性,因此,药敏检测是目前国际上唯一一种了解致病菌药物敏感情况的方法。药敏检测结果的可靠性,不能完全通过药物的实际实用效果来验证。

药敏检测的方法是一种常规方法,临床上多采用纸片法。但药敏检测前需要进行致病菌的分离纯化鉴定,致病菌的鉴定方法决定了药敏结果的可靠性差异。一般来说,人们习惯将药敏检测前的致病菌鉴定也笼统归入药敏检测的一个步骤,因而药敏检测方法按其严谨程度基本上分为两大类,即标准药敏检测和简化药敏检测。

1) 标准药敏检测

先从动物或人身上取样分离致病菌。由于动物和人身上的细菌有亿万之众,因此,分离鉴定致病菌有一定难度。一般应根据经验确定推测致病菌的种类和含有致病菌较多的部位,然后取样划平板,挑取与推测致病菌形态一致的菌落,进行菌种鉴定。经鉴定的纯化致病菌可用于药敏检测。

致病菌的鉴定方法:

l 严谨方法

严格的致病菌鉴定方法需通过毒力回接,即将分离纯化的疑似致病菌接入与感染个体种类相同或有可比性的健康动物个体。如疑似致病菌能使实验动物产生与感染动物相同的症状,并且从实验动物相同的部位取样用相同的方法处理能分离到疑似致病菌,则该细菌可确证为实际致病菌。这种方法由于费时费力和动物模型模拟性的限制,只用于新疾病和新致病菌的科学研究,无法在临床中应用。

l 常规方法

由现代医学发展而来,是现在人类临床中常用的药敏检测方法。对于人类疾病和动物的常规疾病,利用现代医学的知识和多种检测手段,已基本可以确定致病菌的种类。因此,只需根据推测致病菌的生化特性进行菌种鉴定,即可找到致病菌。这种方法的风险是一些新疾病和新致病菌,可能呈现的特征与某种常规疾病类似,造成误诊。但这种情况发生的概率较小。这种方法推广的限制因素有两条:一是常规诊断,一般医院可实现,但兽医有局限;二是菌种的生化鉴定,多数医院无此条件。因此,该方法通常只局限于各方面条件均非常优厚的大医院。

2) 简化药敏检测

在现实操作中,特别是在兽医临床中,由于条件和成本的限制,药敏检测的准备步骤多在标准方法基础上被简化,其简化内容仍然在致病菌的分离鉴定。

l 单菌法

用样本涂布平板,挑取单菌落,进行药敏检测。此过程有时被与镜检和疾病常规知识结合,减少误差,但未进行充分的常规检验和菌种生化鉴定。此方法与标准方法相比,操作简化,一定程度上节约了成本和时间,但在对感染个体常规检验少的情况下,挑错细菌的概率很大,造成“差之毫厘,谬之千里”。此方法较常用于兽医临床和中小医院的人体临床。用在养殖生产的兽医临床时,误差很大;用在人类临床上,因结合了临床检验,误差小于兽医临床,但仍远远高于标准方法。

l 样本替代法

不分离鉴定致病菌,用样本代替纯化的致病菌。这种方法对于取样部位的要求较高:如找到只含有致病菌的样品,结果就非常准确;如样品中细菌以致病菌为主或为主要菌群之一,则药敏检测结果具有很大参考性;如样品中致病菌为极少数菌,则药敏结果的参考价值较小。

为什么样品中含有杂菌,药敏检测结果仍具有参考性呢?

科学实验证实,当几种细菌混合时,其药敏结果同耐药菌。即无论几种菌混合,如果细菌数相差不过于悬殊(如数量差异在四五个数量级以上),则对于单种药物而言,只要有一种细菌耐药,则混合菌显示耐药。也就是说,如果致病菌在样品中是主要的菌群之一(不一定是最大的菌群),则它的耐药性在药敏检测结果中会得到充分体现,呈现敏感的药物对致病菌一定有效,但显示耐药的药物不一定无效(可能被非致病菌的耐药性遮盖)。因此,这种方法如运用得当,对指导用药而言已经足够。

现在兽医临床上多采用这种方法,常见的步骤为:A. 根据经验取样,置于液体培养基或无菌水中,充分振荡后取上清铺平板,进行药敏检测。B. 直接用样本或样本匀浆物涂布在平板上,进行药敏检测。这两种操作方法的缺陷是样本中的细菌数通常不够多,很难保证细菌在平板上均匀密布,因此,对抑菌圈难以判定。

样本替代法比上述任何一种其他药敏检测方法更简单,节约时间至少一倍以上,赢得了治疗的最佳时机。

2. 选药盒的评价

天甲牌诊断选药盒采用的是简化药敏检测方法中的样本替代法。

1) 创新点和优势:

l 第一次将“为临床治疗服务的药敏检测手段(含其准备工作)”产业化,提供了一种产品及其配套使用方法,能在没有专业设备的条件下,开展药敏检测,并保证检测结果对临床治疗有较强的指导作用。

l 以产品说明书的方式,提供了针对不同检测对象的方法步骤,使操作步骤优化,提高药敏结果的可靠性。与常用的同类方法相比,增加了液体培养步骤,提高了药敏结果的可观察性,增加了推广应用的价值。虽然液体培养也增加了改变菌群比例的风险,但通过控制培养的条件,可以将这种风险减少到最低,即基本不影响选药结果的指导性。

l 对于复合感染,检测结果的指导性高于其他方法。

l 选药盒设计的装置,提高了药敏的筛选效率。

3. 药物剂量问题

l 由于养殖生产中预防用药频繁,治疗用药(包括宠物)盲目提高剂量,因此,用传统的概念和国际上制定的药物剂量标准已无法有效控制疾病。因此,常规方法与实际应用情况脱节。也就是说,如果以标准纸片做药敏检测,而超剂量用药,那么原本无效的药物可能效果很好;如果用增加药物剂量的纸片(按一定比例增加药物含量)做药敏检测,而按标准用药或者各种药物的使用剂量随机变化,那么看似有效的药物可能无效,药效之间缺乏可比性。

l 我们的选药盒力求一定程度上改变这种局面,根据生产上实际用药情况确定药敏纸片的药物含量。但此做法已无医学上的规范可言。并且,由于各地的用药情况相差悬殊,各品种药物的使用剂量变化很大(如某地A药的实际用量是标准剂量的2~3倍,B药的实际用量是标准剂量的1.2~1.5倍),因此,用一套固定含药量的纸片很难反应实际用药的情况,若想结果具有代表性,只能根据多数情况设计剂量。也就是说,如果遇到乱用药物剂量的情况,药敏结果与实际用药效果出现严重分歧也是相当正常的。

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